DEFINICIONES
Se define el Límite de Detección (LD) como la menor cantidad o menor concentración de analito que puede ponerse en evidencia; para un determinado analito, varía según el método analítico que se utilice y en la literatura especializada se encuentran diversas definiciones de LD, aplicables en función de la técnica analítica considerada.
Además del LD basado en la evaluación visual y del basado en el ruido de fondo o relación señal/ruido del instrumento de medida, que no requieren el concurso de cálculos estadísticos, se consideran varios LD, obtenidos todos por cálculo a partir de las desviaciones tipo de las respuestas analíticas. La guía CPMP/ICH/281/95 considera los siguientes:

    1.- LD basado en la relación señal/ruido, aplicable a aquellos procedimientos analíticos en los que el aparato de medida presenta un ruido de fondo o línea de base. Su determinación se efectúa comparando las señales obtenidas a partir de muestras conteniendo bajas concentraciones, conocidas, de analito con preparaciones sin analito (blancos) y estableciendo la concentración mínima a la cual el analito puede ser detectado de una manera fehaciente. Se considera generalmente aceptable una relación señal/ruido comprendida entre 3/1 y 2/1
    2.- LD basado en la desviación tipo de las respuestas del blanco. La estimación de esta desviación tipo se efectúa midiendo la magnitud de las respuestas analíticas de un número apropiado de muestras blanco.
    3.- LD basado en la desviación tipo residual de la regresión, efectuada con muestras conteniendo concentraciones de analito en el rango del LD.
    4.- LD basado en la desviación tipo del término independiente de la citada recta de regresión.
Cuando el LD se basa en una desviación tipo de las respuestas, el resultado obtenido en unidades de respuesta, debe dividirse por la pendiente de la recta de regresión con el fin de expresarlo en unidades de concentración de analito. En estos casos es generalmente aceptable un LD resultante de multiplicar por 3.3 la desviación tipo considerada. La nota CPMP/ICH/281/95 establece que el valor de LD obtenido por cálculo puede ser confirmado o validado mediante el análisis independiente de un número adecuado de muestras conteniendo cantidades de analito cercanas al LD.
En los textos especializados se define también un Límite de Cuantificación (LC) como la menor cantidad de analito que puede cuantificarse con seguridad por el método que se considera. Valores típicos del LC son, para el cálculo basado en la relación señal/ruido, una relación de 10 a 1 y para los calculados a partir de desviaciones tipo, el LC es de 3.3 veces el LD (o el resultado de multiplicar por 10 la desviación tipo considerada).

     TRABAJO EXPERIMENTAL
Es muy posible que el analista disponga de datos, procedentes de trabajos efectuados con anterioridad, que permitan estimar un LD. Si no es este el caso y se desea efectuar un determinado trabajo experimental para dicha estimación, será conveniente conocer los siguientes condicionantes a fin y efecto de que el diseño experimental esté acorde con los requerimientos de EVA.
EVA efectuará un análisis de regresión por mínimos cuadrados de los datos introducidos con el fin de calcular la pendiente de la resta de regresión, el término independiente de la misma y las desviaciones tipo residual y de dicho término independiente. Por tratarse de un análisis de regresión, son necesarias respuestas analíticas correspondientes a por lo menos dos valores de variable predictiva.
El diseño experimental recomendado para estimar el LD consiste en preparar un blanco y por lo menos dos muestras conteniendo sendas cantidades de analito separadas por un corto intervalo próximo al LD, y obtener, como mínimo, cinco lecturas (replicados) tanto de cada muestra como del blanco.